লায়োফিলাইজেশন, বা ফ্রীজ শুকানোর একটি সংক্ষিপ্ত পরীক্ষাগার পদ্ধতি
লায়োফিলাইজেশন এর মূলসূত্র
দীর্ঘমেয়াদী সময়ের জন্য একটি ব্যাকটেরিয়া, ফাংগাল, খামির বা অন্যান্য মাইক্রোঅরগানিজম সংস্কৃতি সংরক্ষণের সর্বোত্তম উপায় হলো ফ্রীজ-শুকানোর প্রক্রিয়াটি ব্যবহার করা। এই সংক্ষিপ্ত ল্যাবরেটরি পদ্ধতিটি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ ফ্রীজ-ড্রায়ারের সাথে সম্পন্ন করা যায় যা আপনার সংস্কৃতি সংগ্রহ সংরক্ষণ করবে। যেহেতু lyophilization শুকানোর সবচেয়ে জটিল এবং ব্যয়বহুল ফর্ম, প্রক্রিয়া সাধারণত উচ্চ মানের এর সূক্ষ্ম, তাপ সংবেদনশীল উপকরণ সীমিত হয়। ফিজিং দ্বারা ক্ষতিগ্রস্ত না হওয়া পদার্থ সাধারণত lyophilized হতে পারে যাতে ফ্রিজে স্টোরেজ অপ্রয়োজনীয় হয়।
এই প্রক্রিয়াটি তিন ঘণ্টা, এবং যতদিন 24 ঘন্টা, সংস্কৃতি বৃদ্ধি সময় সহ নাও থাকতে পারে।
লায়োফিলাইজেশন এর ধাপ-দ্বারা-পদক্ষেপ প্রক্রিয়া
প্রথমত, লবি বা অন্যান্য উপযুক্ত পুষ্টির আগর প্লেটের উপর সুক্ষো প্রজন্মের একটি রাতারাতি সংস্কৃতি, বা লোন বাড়ান।
পরবর্তী, ক্যাপ (রাবার স্টপপ )গুলি শীর্ষস্থানে শিথিলভাবে স্থাপন করা অবস্থায়, আগে আগে অটোক্লভ করার মাধ্যমে জীবাণু ছাঁচ-টুপি ভায়োলে তৈরি করে। অটোক্লেভ করার পূর্বে টিউবগুলির ভিতরে সংস্কৃতির সনাক্তকরণের সাথে মুদ্রণ করা কাগজের কাগজগুলি রাখুন। বিকল্পভাবে, জীবাণুর জন্য পরিকল্পিত ক্যাপ দিয়ে টিউব ব্যবহার করুন।
প্লেট থেকে 4 এমএল lyophilization বাফার যোগ করুন। যদি প্রয়োজন হয় তবে কোষগুলিকে একটি স্টারাইল গ্লাসের ছড়ি ব্যবহার করে স্থগিত করা যেতে পারে।
দ্রুত বর্ধিত খণ্ডে সংস্কৃতি সাসপেনশন স্থানান্তর। আনুমানিক আনুমানিক 1.5 এমএল প্রতি শাখা। রাবার ক্যাপ সঙ্গে সীল
একটি -20 ডিগ্রী সেলসিয়াস হিমায়ক মধ্যে খাল স্থাপন দ্বারা বায়ু মধ্যে সংস্কৃতি সাসপেনশন নিশ্চল।
একবার সংস্কৃতির হিমায়িত করা হয়, এটি চালু এবং স্থায়ী তাপমাত্রা এবং ভ্যাকুয়াম অবস্থার স্থিতিশীল করার জন্য সময় অনুমোদিত দ্বারা ফ্রী-ড্রায়ার প্রস্তুত করুন। আপনি ব্যবহার করছেন ফ্রিজ-ড্রায়ার নির্দিষ্ট ব্র্যান্ডের জন্য প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী অনুযায়ী এটি করুন।
যত্ন সহকারে, এবং অকেজোভাবে, বায়ু ক্যাপ ঢেকে রাখুন বায়ুর উপরে, যাতে আর্দ্রতা নিশ্চল শুকানোর প্রক্রিয়ার সময় পালিয়ে যেতে পারে, এবং একটি শূকর-ড্রায়ার চেম্বার মধ্যে বায়ুশক্তি স্থান। নির্মাতার নির্দেশ অনুযায়ী ভ্যাকুয়ামটি চেম্বারে প্রয়োগ করুন।
সম্পূর্ণরূপে lyophilize (শুষ্ক আউট) সংস্কৃতি সময় অনুমতি দিন প্রতিটি নমুনাের ভলিউম এবং আপনার কতগুলি নমুনা আছে তার উপর নির্ভর করে এটি কয়েক ঘন্টা থেকে রাত্রি পর্যন্ত নিতে পারে।
নির্মাতার নির্দেশ অনুযায়ী ফ্রিজ-ড্রায়ার চেম্বার থেকে নমুনাগুলি সরান এবং অবিলম্বে রাবার ক্যাপগুলির সাথে খাঁজটিকে সীলমোহর করুন, তারপর টুকরো টুকরো করুন।
কক্ষ তাপমাত্রায় lyophilized সংস্কৃতি সংগ্রহ সংরক্ষণ করুন
পণ্য আপনি প্রয়োজন হবে
- ফ্রিজ-ড্রায়ার
- পুষ্টি বা অন্যান্য উপযুক্ত আগার প্লেট (এবং ইনকুবটর সংস্কৃতির বৃদ্ধি)
- কাচ যষ্টি
- লুইফিলাইজেশন বাফার
- রাবার stoppers (এবং একটি crimper ক্যাপ প্রয়োগ করার জন্য)
- হিমায়ক
রেফারেন্স:
এসপি বৈজ্ঞানিক ফ্রিজ শুকানোর বেসিক মূলনীতি http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/