প্রোটিন ইঞ্জিনিয়ারিং জন্য সরঞ্জাম

01 পলিমারেজ চেন রিঅ্যাকশন

02 নিয়ন্ত্রণ এনজাইম

সীমাবদ্ধতা endonucleases হিসাবে পরিচিত এনজাইম আবিষ্কার প্রোটিন ইঞ্জিনিয়ারিং থেকে অপরিহার্য হয়েছে। এই এনজাইম নিউক্লিওটাইড সিকোয়েন্সের উপর ভিত্তি করে নির্দিষ্ট অবস্থানে ডিএনএ কাটা। শত শত বিভিন্ন সীমাবদ্ধতা এনজাইম , একটি নির্দিষ্ট স্থানে ডিএনএ কাটা করতে সক্ষম, ব্যাকটেরিয়া বিভিন্ন স্ট্রেঞ্জ থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছে। ডিএনএ একটি সীমাবদ্ধতা এনজাইম সঙ্গে কাটা অনেক ছোট টুকরা, বিভিন্ন মাপের উত্পাদন। এই জেল ইলেক্ট্রোফোরিসিস বা ক্রোমাটোগ্রাফি ব্যবহার করে পৃথক করা যায়।

03 ইলেক্টোপহোরেসিস

ডিএনএ-এর দৃশ্যমানতা নাও হতে পারে এমন একটি কোষের সংস্কৃতি থেকে ডিএনএকে সারিয়ে তুলতে বা সীমাবদ্ধতা এনজাইম দিয়ে এটি কাটাতে অনেক বেশি ব্যবহার করা যাবে না - অর্থাৎ আপনার এক্সট্র্যাক্টে কিছু রয়েছে কিনা তা দেখার জন্য একটি উপায় খুঁজে বের করুন, অথবা কোন আকারের টুকরা আপনি এটা কাটা কাটাতে এটি করার একটি উপায় হল জেল ইলেক্ট্রোফোরিয়সিস। ডিএনএ সন্নিবেশ এবং knockouts সনাক্ত করার জন্য ডিএনএ কাটা থেকে দেখতে বিভিন্ন ধরনের উদ্দেশ্যে গিল ব্যবহার করা হয়।

04 ডিএনএ এর দুটি টুকরা যোগ দিন

জেনেটিক গবেষণায়, ডিএনএর দুই বা ততোধিক পৃথক উপসর্গগুলি সংযোগ করার জন্য প্রায়ই পুনর্নবীকরণযোগ্য তীর তৈরি করা বা সীমাবদ্ধকরণ এনজাইম দিয়ে কাটা হয়েছে এমন একটি বৃত্তাকার প্রান্ত বন্ধ করা প্রয়োজন। এনজাইম বলা হয় এনএনএ লিগেস নিউক্লিওটাইড চেইনগুলির মধ্যে সহস্রাব্দের বন্ধন তৈরি করতে পারে। এনজাইম ডিএনএ পলিমারেজ 1 এবং পলিনোকিওউটাইড কিনেজ যথাক্রমে 5 'সমাপ্তি, ফাঁকা বা ফসফরালেটিং ভর্তি জন্য, এই প্রক্রিয়ার মধ্যে গুরুত্বপূর্ণ।

05 ক্ষুদ্র স্ব-প্রতিলিপি ডিএনএ নির্বাচন

ডিএনএর ছোট বৃত্তাকার টুকরো যা ব্যাক্টেরিয়াল জিনের অংশ নয় কিন্তু স্ব-প্রতিক্রিয়া সক্ষম, প্লাসমিড নামে পরিচিত। প্লাজমডগুলি প্রায়ই অণুজীবজগতে জিনগুলির পরিবহন করার জন্য ভেক্টর হিসাবে ব্যবহার করা হয়। জৈবপ্রযুক্তিতে একবার, সুদীর জিনকে সম্প্রসারিত করা হয় এবং জিন এবং প্লাসমিন উভয়ই সীমাবদ্ধতা এনজাইম দ্বারা কাটা হয়, তারা একসঙ্গে একত্রিত হয় যা পুনর্বিন্যাসকারী ডিএনএ হিসাবে পরিচিত হয়। ভাইরাল (ব্যাকটেরিয়াফাজ) ডিএনএকেও একটি ভেক্টর হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে, যেমন কোসমেড, ব্যাকক্রাইওফেজ জিনযুক্ত রিমিক্ব্যান্যান্ট প্লাসমিডস।

06 হোস্ট সেলে একটি ভেক্টর সরানোর পদ্ধতি

যান্ত্রিক বস্তুকে একটি ভেক্টর যেমন প্লাসমিড, নতুন হোস্ট কোষগুলির মধ্যে স্থানান্তর করার পদ্ধতিকে রূপান্তর বলা হয়। এই কৌশলটি প্রয়োজন যে হোস্ট কোষ একটি পরিবেশগত পরিবর্তনের সম্মুখীন হয় যা তাদের "সক্ষম" বা অস্থায়ীভাবে ভেক্টরকে প্রবেশ করে। ইলেক্ট্রোপ্যারেশন এক ধরনের কৌশল। বৃহত্তর প্লাসমিড, কম দক্ষতা যার দ্বারা এটি কোষ দ্বারা গৃহীত হয়। বৃহত্তর ডিএনএ অংশগুলিকে আরও সহজেই ব্যাকটিরিয়াফ্যাজ, রেট্রোভারাস বা অন্য ভাইরাল ভেক্টর বা কোসমেডস দ্বারা ট্রান্সডাকশন নামে একটি পদ্ধতিতে ক্লোন করা হয়। ফেজ বা ভাইরাল ভেক্টরগুলি প্রায়ই পুনর্জন্মের ঔষধে ব্যবহার করা হয় কিন্তু আমাদের ক্রোমোসোমের অংশে ডিএনএ সন্নিবেশ করানো হতে পারে যেখানে আমরা এটি চাই না, জটিলতা সৃষ্টি করে এবং এমনকি ক্যান্সারও।

07 ট্রান্সজেনিক অর্গানিজমের নির্বাচন পদ্ধতি

রূপান্তর না হওয়া সত্ত্বেও সমস্ত কোষ ডিএনএ গ্রহণ করবে না। এটা জরুরী যে সেখানে যেগুলি সনাক্ত করা একটি পদ্ধতি আছে। সাধারনত, এন্টিবায়োটিক প্রতিরোধের জন্য প্লাসমিডগুলি জিন বহন করে এবং ট্রান্সজেনিক কোষগুলিকে সেই জিনের অভিব্যক্তি এবং এন্টিবায়োটিক ধারণকারী মিডিয়াগুলিতে বৃদ্ধি করার উপর ভিত্তি করে নির্বাচন করা যেতে পারে। নির্বাচনী পদ্ধতির বিকল্প পদ্ধতিগুলি অন্য রিপোটার প্রোটিন যেমন এক্স-গ্যালিল / এলএইচজেড সিস্টেম, বা সবুজ ফ্লোরোসেস প্রোটিন উপস্থিতির উপর নির্ভর করে, যা যথাক্রমে রঙ এবং ফ্লোরোসেসের ভিত্তিতে নির্বাচন করা যায়।