1983 সালে তৈরি করা হয়, পিসিআর প্রক্রিয়াটি ডিএনএ শনাক্তকরণ এবং পৃথক জিনের নিউক্লিওটাইডের ক্রম সনাক্ত করতে সক্ষম হয়েছে।
পদ্ধতি তাপ সাইক্লিং বা ডিএনএ গলে এবং প্রতিলিপি জন্য প্রতিক্রিয়া পুনরাবৃত্তি গরম এবং কুলিং ব্যবহার করে। পিসিআর অব্যাহত থাকলে, "নতুন" ডিএনএটি প্রতিলিপি করার জন্য একটি টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয় এবং একটি চেইন প্রতিক্রিয়া ensues, দ্রুততম ডিএনএ টেমপ্লেট amplifying।
পিসিআর কৌশলগুলি জৈবপ্রযুক্তি প্রক্রিয়াকরণ প্রকৌশল , ক্লোনিং, ফরেনসিকস (ডিএনএ ফিঙ্গারপ্রিন্টিং), পিতার টেস্টিং, বংশগত এবং / অথবা সংক্রামক রোগের নির্ণয়ের এবং পরিবেশগত নমুনা বিশ্লেষণসহ অনেকগুলি ক্ষেত্রে প্রয়োগ করা হয়।
ফরেনসিকের ক্ষেত্রে, বিশেষ করে, পিসিআর বিশেষভাবে উপযোগী কারণ এটি ডিএনএ প্রমাণের সবচেয়ে ছোট পরিমাণও বৃদ্ধি করে। পিসিআরটি ডিএনএ বিশ্লেষণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে যা হাজার হাজার বছরের পুরনো, এবং এই প্রযুক্তিগুলি পৃথিবীর প্রায় 800,000-বছর-বয়সী ম্যামথ থেকে মমি পর্যন্ত সবকিছু সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছে।
পিসিআর পদ্ধতি নিম্নরূপ:
- প্রারম্ভিকীকরণ: এই ধাপ শুধুমাত্র ডিএনএ পলিমারেসের জন্য আবশ্যক যা গরম প্রবাহের PCR প্রয়োজন। প্রতিক্রিয়া 94 থেকে 96 ° C মধ্যে উত্তপ্ত এবং 1-9 মিনিটের জন্য অনুষ্ঠিত হয়।
- Denaturation: পদ্ধতির আরম্ভের প্রয়োজন হয় না , যদি, denaturation প্রথম ধাপ। প্রতিক্রিয়া 20-30 সেকেন্ডের জন্য 94-98 ° C গরম হয়। ডিএনএ টেমপ্লেট এর হাইড্রোজেন বন্ধন বিঘ্নিত হয় এবং ডিএনএ অণুগুলি একক-বিভক্ত হয়ে যায়।
- এনিলিং: প্রতিক্রিয়া তাপমাত্রা 50 থেকে 65 ডিগ্রি সেন্টিমিটার কম এবং ২0-40 সেকেন্ডের জন্য রাখা হয়। প্রাইমাররা একক-ভ্রান্ত ডিএনএ টেমপ্লেটে প্রবেশ করে। এই ধাপের সময় তাপমাত্রা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। এটি খুব গরম যদি, প্রাইমারটি বাঁধতে পারে না। যদি এটি খুব ঠাণ্ডা হয়, প্রাইমারটি অকার্যকরভাবে আবদ্ধ হতে পারে প্রযোজক ক্রম ঘনিষ্ঠভাবে টেমপ্লেট ক্রম সঙ্গে মিলে যখন একটি ভাল বন্ধন গঠিত হয়।
- এক্সটেনশন / সংযোজন: এই ধাপের সময় তাপমাত্রা পলিমারেজের উপর নির্ভর করে। ডিএনএ পলিমারেজ একটি সম্পূর্ণ নতুন ডিএনএ তীরচিহ্ন synthesizes।
- চূড়ান্ত প্রতীয়মান: এই ধাপ চূড়ান্ত PCR চক্র পরে 5-15 মিনিটের জন্য 70-74 ° সি সঞ্চালিত হয়।
- ফাইনাল হোল্ড: এই পদক্ষেপটি ঐচ্ছিক। তাপমাত্রা 4-15 ° C এ রাখা এবং প্রতিক্রিয়া strops।
পদ্ধতি তিনটি পর্যায়ে বিভক্ত:
- সূচকীয় বিস্তার: প্রতিটি চক্রের সময়, পণ্য (ডিএনএর নির্দিষ্ট অংশ যা প্রতিলিপি করা হচ্ছে) দ্বিগুণ হয়।
- স্তর-বন্ধ স্তর: হিসাবে ডিএনএ পলিমারেজ কার্যকলাপ হারায় এবং reagents হ্রাস, প্রতিক্রিয়া slows।
- প্লেটও: কোন পণ্য আরোপিত।